串聯(lián)質(zhì)譜(msms):對(duì)mz587母離子進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離(cid)。
碎片離子譜顯示:存在多個(gè)含氮雜環(huán)結(jié)構(gòu)(如喹啉、異喹啉特征碎片)、
長(zhǎng)鏈脂肪酸片段(mz256,cho?)、
以及復(fù)雜的連接基團(tuán)。提示毒素為生物堿與合成有機(jī)物的雜合體!
毒性機(jī)制推斷:
結(jié)構(gòu)特征:含氮雜環(huán)(生物堿核心)具神經(jīng)毒性潛力;
長(zhǎng)鏈?zhǔn)杷鶊F(tuán)易嵌入細(xì)胞膜,導(dǎo)致細(xì)胞毒性;
酰胺鍵及極性基團(tuán)可能干擾酶功能或離子通道。
病理印證:阿毛的肝壞死(細(xì)胞毒性)、
小梅的腎小管壞死凝血障礙(酶抑制膜損傷)、
老張的神經(jīng)肌肉痙攣(神經(jīng)毒性)均與結(jié)構(gòu)推測(cè)相符!
致畸性:分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜,含潛在dna嵌入基團(tuán)(芳香環(huán)),存在致突變致畸風(fēng)險(xiǎn)。
2.熒光標(biāo)記:追蹤死神的足跡
異常發(fā)現(xiàn):在hplc分析中,林一注意到毒素峰附近(保留時(shí)間22.5分鐘),
有一個(gè)極其微弱、但尖銳的伴峰!峰面積很小,易被忽略。
熒光檢測(cè)器(fld):林一啟動(dòng)hplc的熒光檢測(cè)器(激發(fā)波長(zhǎng)360nm,發(fā)射波長(zhǎng)460nm)。
結(jié)果驚人:在22.5分鐘處出現(xiàn)一個(gè)強(qiáng)烈的熒光信號(hào)峰!
而主毒素峰(22.3分鐘)無(wú)熒光響應(yīng)!
分離純化:林一利用制備型hplc,精確收集22.5分鐘流分。
熒光物質(zhì)分析:
紫外光譜:最大吸收峰在365nm(紫外燈下顯亮藍(lán)色熒光)。
質(zhì)譜:gc-ms顯示該物質(zhì)分子量?。╗m]mz212),結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單(含苯環(huán)、羧基、熒光基團(tuán))。
結(jié)論:這是一種人工合成的熒光標(biāo)記物!
化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,熒光強(qiáng),極微量即可檢測(cè)!
其保留時(shí)間與毒素主峰極其接近(相差僅0.2分鐘),但并非毒素本身,
它像幽靈般附著在毒素上,如同一個(gè)隱形的追蹤器!
3.毒素性質(zhì)總結(jié):
名稱(暫定):“poundx-587”(基于分子量)。
分子式:chno。
結(jié)構(gòu)特征:復(fù)雜雜合分子,含生物堿核心(神經(jīng)毒性)、
長(zhǎng)鏈?zhǔn)杷鶊F(tuán)(細(xì)胞毒性)、潛在酶抑制膜損傷基團(tuán)(腎毒性凝血毒性)。
關(guān)鍵特性:含微量人工熒光標(biāo)記物(追蹤劑)!
非天然產(chǎn)物!高度懷疑為人工設(shè)計(jì)合成!
來(lái)源推斷:需要專業(yè)化學(xué)合成能力(有機(jī)合成實(shí)驗(yàn)室)、
毒理學(xué)知識(shí)(針對(duì)性設(shè)計(jì)多器官毒性)、精密分析設(shè)備(質(zhì)控)。
指向大型制藥化工企業(yè)或高級(jí)研究機(jī)構(gòu)!
未完待續(xù)!
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